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用Matrigel™包被培养板培养多能干细胞

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发表于 2013-10-16 14:30:34 | 显示全部楼层 |阅读模式
描述:

使用mTeSR™1(产品号 #05850/05870/05875)或TeSR™2(产品号 #05860/05880)培养和维持人胚胎干细胞(hESCs)和人诱导多能干细胞(iPSCs)时,需要用基质包被培养板,从而对细胞的附着和扩增起到支持作用。

我们推荐使用BD Matrigel™ hESC-qualified Matrix(BD产品号 #354277)包被培养板。BD Matrigel™ hESC-qualified Matrix的稀释方法说明随产品附送,由BD Biosciences提供。基质的稀释倍数由BD Biosciences根据每批号的蛋白质浓度计算。请参阅产品的指定分析认证,可在线查询获取

很重要的一点是,包被组织培养板时必须将Matrigel™涂得均匀并且完全覆盖培养板。否则在Matrigel™包被不完全的部位,细胞将不能完全贴壁。避免包被不均匀的一个方法是,将涂过基质胶的培养板于室温下放置在生物安全柜1小时,并将培养板的盖子盖好(防止基质变干)。如果实验时间比较匆忙,也可将涂好的培养板放在37℃培养箱中30分钟。同时确保生物安全柜或细胞培养箱的表面水平(可使用气泡水平仪确认),也不要将各培养板叠放。

包被好的培养板可在2 – 8℃保存长达一个星期(用Parafilm™将培养板封口,以防基质变干)。同时也要确保冰箱搁板水平而不倾斜。我们不建议使用局部包被不均匀或因保存不当而导致Matrigel™变干的培养板。

应用成份完全确定的TeSR™2培养基培养hPSC,培养板的包被可使用StemAdhere™成分确定,用于人多能干细胞培养的基质(产品号 #07160)而非Matrigel™。

更多关于应用mTeSR™1TeSR™2培养多能干细胞的信息请查阅技术手册。
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